Приглашаем посетить сайт
РАМОН-И-КАХАЛ
РАМОН-И-КАХАЛ Сантьяго (Santjago Ramon у Cajal, род. в 1852), испанский гистолог и исследователь нервной системы. В 1873 г. окончил мед. факультет в Сарагоссе и начал работу военным врачом. В 1883 году получил кафедру сравнительной анатомии в Валенсии, в 1887 г. перешел
/ ""~-^ лог,однако познакомив- ^^^^^Н^^^^^^^К тодов, он углубился в
<^ер^*^^^^ исследование нервной системы. Он изучает как внешние формы, так и внутреннее строение нервных клеток, нервные окончания, связь между клетками, фил о- и онтогенез, дегенерацию и регенерацию нервной ткани, невро-глию. Ортодоксальный целлюлярист, противник ретикулистов, т. е. признающих синци-тиальное строение ткани, Кахал является основоположником невронной теории. По Кахалу, нервные клетки и клетки невроглии-это отдельные организмы с подвижными отростками. Между нервными клетками-невронами осуществляется контакт. Раздражение воспринимается дендритами и телом, а передается по аксону,-принцип динамической поляризации; позже он корректирует его и говорит об аксо-петальной поляризации. В вопросах развития нервной системы он выдвигает ряд положений; например у позвоночных имеются две нервные системы: сенсорно-чувствительная и коро-мозговая. Индивидуальное усовершенствование основывается на укреплении и росте связей между нервными клетками мозга. Регенерация нерва идет только на счет роста центральных отрезков и их колятералей, а не автогенно из Шванновских клеток. При росте клеточного отростка бывает начальный «хаотический» период, когда отростком пускается ряд как бы пробных веток, в большинстве гибнущих. Ней-ротропизм нервных волокон он объясняет ферментами, активирующими протоплазменную ассимиляцию и исходящими от эмбриональной соединительной ткани или Шванновских клеток. Оригинальна идея, что неврофибрилы нервной Клетки-живые образования: мельчайшие невробионы, соединяясь цепочечно, образуют как бы колонии - фибрилы. Большую ценность представляют изыскания Кахала по синаптологии, т. е. учению о связях между невронами в самых разнообразных участках мозга, особенно в коре большого мозга. Невро-тлия состоит из отдельных клеток, обособившихся от эмбриональных эпендимных клеток; тлиофибрил вне клеток нет (вопреки взгляду Вейгерта). Клетки невроглии Кахал делил сначала на астроциты протоплазменные и волокнистые и третий элемент; потом вместе с учениками (Гортега) он стал выделять в основе мозга клетки мезодермалы-юго происхождения-мезоглию. Научные труды Кахала. Кроме многочисленных статей, руководств по нормальной и пат. гистологии и руководств по технике Р. принадлежат следующие монографии: «Les nouvelles idees sur la fine anatomie des centres nerveux» (P., 1894); «Studien uber die Hirnrinde des Menschen» (Hefte 1-5, Lpz., 1900); «Die Retina <ier Wirbeltiere» (Berlin, 1894); «Studien uber Nervenregeneration» (Lpz., 1908); «Histologie du systeme nerveux de l'homme et des verte-bres» (vol. I-II, P., 1909-1911); «Estudios sobre la degeneracion у regenefacion del siste-ша nerVІoso» (vol. I-II, Madrid, 1913-1914); «Etude sur la neurogenese de quelque vertebres» (P., 1923); «Degeneration and regeneration of the nervous system» (L., 1928). Кроме того им издавались «ReVІsta trimestral micrografica» <vol. I-V, Madrid, 1896-1900) и издаются «Trabajos del Laboratorio de investigaciones biologicas» (Madrid, с 1901).
Лит.: Снесарев П., Сантьяго Рамон-и-Кахал, жизнь и научная деятельность, Сов. невропатол., т. I, вып. 12, 1932. Модификация метода Гольджи состоит в том, что проведенный уже по Гольджи кусочек повторно переносится в бывшую в употреблении жидкость-двухромовокислый калий с осьмиевой к-той, потом снова в серебро. Другие методы имеют специальное назначение для неврофибрил, нервных волокон, глии и т. д.- Неврофибрилярный метод. Свежие кусочки толщиной в 3-4 мм помещаются на 3-5 дней в термостат в 0,75-3%-ный раствор Argenti nitrici. Промыть в дест. воде (1 минута); перенести на 24 часа в жидкость: пирога-ловая к-та или гидрохинон--1-2 г, формоль- 15 мм3, дест. вода-100 см3. Промыть в воде и заключить в целлоидин или парафин. Золочение и фиксация по методу Белыновского.--Модификация для безмякотных волокон. 1. Фиксация кусочка в 3-4 мм толщиной в 96%-ном алкоголе с аммиаком (на 100 см3 8 капель)-24 часа. 2. Перенести в 1.5%-ный раствор Argenti nitrici на 5 дней при 37-40°. 3. Быстрое ополаскивание в дест. воде (секунды). 4. Редукция в жидкости: пирогал-ловая к-та-1 г, дест. вода-100 см3, формоль- 10 см3, 24 часа. Промывание, заключение в парафин. Другая модификация для той же цели: 1. Фиксация в жидкости: хлорал-гидрат-2- I 5 г, 96%-ный алкоголь--40 см3, дест. вода- 40 см3 (сутки), потом в 96%-ном спирту с аммиаком (на 20 см31 кап. Amm. caust. triplex) тоже сутки. 2. Обсушить фильтровальной бумагой, не промывая, и положить в 2%-ный раствор Arg. nitrici в термостат при 37-38° на 9-10 дней. 3. Редукция: пирогалловая к-та-1 г, формоль-10 "см3, дест. воды-100 см3 (сутки). 4. Промывание, спирты и быстрое заключение в парафин. Для мозжечковых элементов, а также для концевых двигательных пластинок. 1. Фиксация в формалине 3 дня и дольше. 2. Замороженные срезы 30-40 /г класть в формалин. 3. Быстро ополоскать в дест. воде и положить на 4-6 часов в жидкость: 2%-ный раствор Arg. nitrici--12 см3, пиридин-7-10 капель, 97%-ный алкоголь-5-6 см3; подогреть над пламенем несколько минут до побурения. 4. Каждый срез перенести в абсолютный алкоголь на 2-4 часа. 5. Редукция в жидкости: гидрохинон- 0,3, дест. вода-70 см3, формоль-20 см3, ацетон-15 см3 в течение 1-3 мин. 6. Промывание, золочение, фиксация и т. д. Де Кастро (de Castro) несколько изменил эту модификацию для симпат. ганглиев.-С корый пиридиновый серебряный метод. Хорош для безмякотных волокон. 1. Фиксация в 14%-ном формалине; замороженные срезы. 2. Быстро провести через 2 порции дест. воды и положить в жидкость: 2%-ный раствор Arg. nitr.--10 см3, пиридин-8 капель и 96%-ный алкоголь-4' см3; дать постоять минуту и подогревать над пламенем до появления табачного цвета. 3. Быстро, провести (3 секунды) через 96%-ный алкоголь. 4. Редукция в течение 1 и более минут в жидкости: гидрохинон-0,2- 0,3 г, дест. вода-70 см3, нейтральный формалин-20 см3, ацетон-15 см3. Для вегетативных волокон Снесарев рекомендует срезы предварительно обезжиривать (спирты восходящей крепости, хлороформ 40 мин., спирты нисходящей крепости-дест. вода). Потом на xj2 часа- 1 час в термостате в жидкости: дестили-рованная вода-20 см3, нейтральный формалин-30 капель, 0,1%-ный раствор пирогалло-вой кислоты 5-10 капель. Методы для невроглии. Метод-золото с сулемой для протоплазменной глии. Фиксация в жидкости: 1. Нейтральный формоль-15 см3, дест. вода-85 см3, бромистый аммоний-2 з; срок от 2 до 20 дней. 2. Замороженные срезы (20-30 ft) собирать в фиксатор. 3. Быстро ополоснуть в дест. воде (секунды). 4. На 4-8 часов при 18-20° в жидкость: дест. вода-35 см3, 1%-ный водный раствор химически чистого бурого хлорного золота-6 см3, сулема кристаллическая в иглах-0,5-0,8 г. Свеже готовить при нагревании; брать 5-8 срезов на 35 см3: держать в темноте. 5. Несколько минут ополаскивать в большом количестве дест. воды. 6. На 6-8 мин. в фиксатор: 5%-ный гипосульфит-40 см3, 96%-ный алкоголь- 10 см3. 7. Обмыть в жидкости: на 100 см3 воды взять 30-40 см3 96%-ного алкоголя. 8. Перенос на предметное стекло, фильтр, бумагу, абсолютный спирт, оригановое или карболовое масло, ксилол, бальзам. Метод бром-ф о р м о л ь-с ер'ебряный для протоплазменной глии и глиофибрил. 1. Фиксация (от 2 до 25 дней) в жидкости: бромистый аммоний- 2 г, дест. вода-S5 см3, формоль-15 см3. 2. Замороженные срезы брать в ту же жидкость. 272: 3. Усилитель: на несколько часов в жидкость: дест. вода-70 см3, бромистый аммоний - 3 г, нейтральный формоль-30 см3 (для фибрил не нужен). 4. Три порции дест. воды-быстро. 5. Аммиачное серебро 10 см3 о 8 каплями пиридина. Срезы держать 5 -10 мин., потом подогреть до табачного цвета. Приготовление аммиачного серебра: к 20 см310%-ного Arg. nitrici прибавить 22 капли 40%-ного NaOH; после встряхивания промыть осадок 6-7 раз дест. водой, окончательно прибавить 10 см3 дест. воды и 4 см4 аммиака (22% -ный), потряхивать до растворения осадка. Сохранять в темноте. 6. Быстро (3 секунды)-через две порции дест. воды. 7. Редукция. 5%-ный формалин 2-5 мин. 8. Золочение , фиксация и т. д .-М е т о д уран-формоль для глиосом, липоидных включений и Гольджи-аппарата различных клеток. 1. Фиксация свежих кусочков не толще 3-4 ii 24-48 часов в жидкости: уран-нитрат- 1 г, формоль нейтральный-15 см3 и дест. вода-85 см3. 2. После быстрого промывания в дест. воде положить в 1,5%-ный раствор Arg. nitrici на 2 и больше дня при комнатной t°. 3. Быстро ополоснуть в дест. воде. 4. Редукция: гидрохинон-1 г, формоль-10 см3, сульфит (Natriumsulfit) приблизительно 0,15 г До коричневого тона-24 часа. 5. Промыть, обезводить, залить в целлоидин. Метод этот годен и для ретикулярного аппарата Гольд-жи; нужно фиксировать только 12 часов. Для Гольджи-аппарата в нервных клетках брать фиксатор с алкоголем (прибавить 96%-ный алкоголь-30 еж3); редукция тоже короче (2- 8-24 часа).
П. Снесарев.