Приглашаем посетить сайт
СНЕСАРЕВА МЕТОДЫ
СНЕСАРЕВА МЕТОДЫ. 1. Метод для не-вроглии: 1) фиксация мозговой ткани вформа-лине; 2) промывка в текучей воде и замороже-ние срезов; последние брать в дест. воду; 3) 30 сек. каждый срез держится в растворе: 1%-ной фосфорномолибдеповой к-ты и столько же дест. воды; прибавить 5-10 капель раствора 1:1 000 углекислого калия; 4) ополаскивание в дест. воде и вылавливание в широкой чашке Петри на стекло, смазанное белок-глицерином. Дать лишней воде стечь, обсушить кругом среза тряпочкой и промокать влажной'фильтровальной бумагой, смоченной в метиловом спир-те+хлороформ (1:2,1:3); поливать срез той же смесью до укрепления и просветления; 5) на влажный срез налить краски Мей-Грюнвальда (красить недолго); 6) прилить 1-3 капли дест. воды и продолжать окраску; 7) диференциров-ка с помощью разведенной ледяной уксусной к-ты (1:2 части воды); 8) промыть в воде и докрасить эритрозином 3-5 мин.; 1 г эритрозина на 150 г дест. воды и 2-3 капли ледяной уксусной к-ты; 9) дест. вода; 10) просушка фильтровальной бумагой; 11) быстро (1-2-3 сек.) опустить в ацетон; 12) ксилол; 13) бальзам. Глиофибрилы красятся в голубой цвет, ядра клеток-в синий и розовый, миелин-в розовый. Тельца Негри-синие. Можно срез сначала окрасить эритрозином, а потом проделать начальную часть. Модификация методаПаппен-геймадля замороженных срезов, особенно для мозга: 1) формалиновая фиксация, промывка, заморожение срезов; последние подогреваются в 33%-ной уксусной к-те до появления паров; 2) вылавливаются из дест. воды и укрепляются на предметном стекле, смазанном белок-глицерином (путем промокания фильтровальной бумагой, смоченной метиловым спиртом+хлороформ); 3) краска Мей-Грюнвальда (около одной минуты); 4) добавить 1-2 капли дест. воды; 5) докрасить по Гимза (1 капля на 1 си3); 6) быстро вода и обсушивание фильтровальной бумагой; 7) на 1-2 секунды'в ацетон; 8) ксилол; 9) бальзам. Автор рекомендует этот метод в качестве ориентировочного для разных тканей. В мозгу окрашивается Нислевская зернистость и тельца Негри (розовые). М-о д ификация метода Янеля (Jahnel) для спирохет: 1) формалиновая фиксация; 2) текучая вода; 3) безводный пиридин 1-2-3 дня; 4) промывание кусочков в текучей воде, потом в дестилированной; 5) заключение в 24%-ной желатине (на 1%-ной карболовой воде)-2 часа и больше; В) остудить желатину, вырезать кусочки, фиксировать их в формалине (до -6 дней); 7) текучая вода, заморожение срезов; 8) дест. вода и 96%-ный алкоголь на час; дест. вода; 9) 5 %-ный азотнокислый уран при 37° в термостате 2-3 часа; 10) 2-3 порции дест. воды; 11) 1 %-ный Arg. nitr. 3-6-12 часов; 12) редукция 5%-ным гидрохиноном (к 5 см3 прибавить 15 см3 70%-ного гуммиарабика). Срезы берутся в чашку Коха с 5 см3 74%-ного азотнокислого серебра; сюда же наливается 15 ем3 70%-ного гуммиарабика и потряхиванием достигается смешивание жидкостей, затем приливается редуцирующая жидкость. (В. К. Белецкий.) 2) Метод для аргирофильных в о л о к о н: 1) фиксация в формалине (10- 14-20%); 2) промывание в текучей воде; 3) несколько раз дест. вода и заключение сначала в 12%-ный, потом в 24%-ный раствор желатины на 1%-ной карболовой воде, все время в термостате (от нескольких часов до 2 суток) ; 4) остужение желатины и фиксация в 5--10%-ном формалине; 5) заморожение срезов; 6) 4 %-ный раствор Alumen ferricum (железные квасцы)-на два дня без термостата; ?) две-три порции дест. воды (10-15 мин.); 8) Argent. nitr. 10%-ный-сутки. Далее срезы проводятся по методу Белыповского, т. е,-быстро дест. вода и аммиачное серебро (3-5-10 мин.), быстро дест. вода и редукция в 20%-ном формалине; потом дест. вода, хлорное золото, 5%-ный гипосульфит, дест. вода и заключение в канадский бальзам. Приготовление аммиачного серебра: к 4 делениям 10%-ного Argent, nitr. в пробирке прибавить 3 капли 40%-ного Na- . trii caust. (химически чистого), осадок не встряхивать, а прилить сверху 5 капель аммиака (L. ammonii caust. triplex). Осторожно потряхивать пробирку с тем, чтобы поднимающиеся в жидкости облачка мути и более плотный осадок растворились в верхнем светлом кольце аммиака. Если недостаточно 5 капель, прибавить еще 1-2-3 до растворения. Далее прилить дест. воды до 20 делений. Для обезвоживания автор рекомендует срезы сначала наклеить белком на стекло и потом проводить через ацетон, ксилол и заключить в канадский бальзам. Модификация того же метода для парафиновых срезов: 1) депара-финирование срезов, спирты, вода; 2) основательное промывание дест. водой; 3) стекла со срезами проводятся через 12,5% и 24%-ную желатину (на 1%-ной карболовой воде) в термостате; 4) дать затвердеть желатине ровным слоем на стороне среза; 5) фиксация-формалин 5-10%-ный; 6) ополоскать дест. водой и положить стекла со срезами на 2 суток в 4%-ный Alumen ferricum. Далее идет-дест. вода, сутки Argent, nitr. 10%-ный и остальное по Белыповскому.
Лит.: Snessareto P., tlber die interstitiellen Stiitzfasern der Anfangsperiode der Entwicklung des Hiih-nerembryos, Zeitschrilt fur die gesamte Anatomie,. Abt. Ill, 1932.
П. Снесарев.