Приглашаем посетить сайт
ДЕТРИТ ОСПЕННЫЙ
ДЕТРИТ ОСПЕННЫЙ (от лат. detritus-распад), тонко измельченное вещество телячьих и коровьих оспин, смешанное в определенной пропорции с глицерином и содержащее живой яд вакцины. Как препарат для предохранительного оспопрививания Д.узаконен ныне во всех культурных странах вместо применявшейся ранее с этой целью гуманизированной вакцины (см. Оспопрививание). Наблюдавшиеся при прививке «с ручки на ручку» случаи передачи сифилиса, рожи, затруднения, связанные с получением гуманизированной вакцины в количестве, потребном для массового оспопрививания, наконец признаки вырождения старой Джен-неровской вакцины с частичной потерей ею иммунизирующих свойств-побудили обратиться к первоисточнику предохранительной коровьей оспы и к изысканию способов искусственного культивирования вакцины на животных. Впервые метод добывания вакцины «исключительно на животных» и применение Д. введены в практику оспопрививания Негри (Negri) в Неаполе в 1848 г. Зрелые оспины теленка вырезывались вместе с основанием, расправлялись раневой поверхностью вниз на ногте большого пальца руки или на медной монете, поверхность их соскабливалась ланцетом, и добытая т. о. кашицеобразная масса применялась для прививок детям и пассажным телятам. За неимением способов к предотвращению загнивания вырезанных оспин, прививки взятым от них соскобом сопровождались иногда серьезными осложнениями, вследствие чего стали прибегать к прививкам «непосредственно с теленка» (de pis a bras). Несмотря на указанные недостатки, метод Негри бы- стро проник во Францию (введен Lanoix в Париже в 1864 г.) и в Германию (введен Pissin'oM в Берлине в 1866 г.). В 1860 г. Эндрю (Andrew) в Чикаго открыл свойство глицерина предохранять оспенный Д. от порчи без ослабления его специфического действия (подтверждено Reveil 'ем во Франции, МйПег'ом в Германии в 1866 г.). Благодаря этому открытию, преимущества Д. (высокая прививаемость, стойкость, возможность добывания в любом количестве) быстро получили общее признание, и в наст. время оспопрививание гуманизированной вакциной запрещено во всех культурных странах (в РСФСР распоряжением НКЗдр. в 1919 г.)--С течением времени из практики текущего оспопрививания получены весьма ценные сведения о Д. с клинич. точки зрения. Столь же плодотворным оказалось и применение эксперимента и методов бактериологии к изучению Д. Добытые при этом данные не оставляют сомнения в необходимости строго методических приемов при добывании и обработке детрита, возможных лишь в условиях соотв. лабораторной обстановки (строгая асептика, бактериологический контроль и т. д.). Заготовка Д. для массового оспопрививания производится ныне повсюду в особых учреждениях, специально приспособленных и оборудованных для этой цели (оспенные телятники и оспенные институты). Требования, к-рым должен удовлетворять хороший и вполне надежный Д., таковы: 1. Высокая прививаемость (вирулентность): в руках опытного оспопрививателя Д. должен дать полных 100% прививаемости по числу детей и по числу надрезов. Не вызывая чрезмерно резкой местной реакции , он должен обладать высокой иммунизирующей способностью и сохранять прививаемость в течение достаточно долгого срока-не менее 3-6 мес. (при обычных условиях пересылки и хранения). 2. Отсутствие случайных, патогенных для человека микробов (В. tetani, гноеродные кокки). Идеальное состояние Д. (полная стерильность в смысле отсутствия в нем всякого рода случайных зародышей) не всегда достижимо, но число банальных сапрофитов в хорошем детрите обычно не должно превышать нескольких сот в 0,01 см3.-В деле добывания безукоризненного Д. существенное значение имеет правильный выбор животных для прививки. Хотя вакцина с успехом прививается многим млекопитающим, но на практике для целей заготовки Д. пригоден почти исключительно крупный рогатый скот-коровы, быки и телята. Лишь при отсутствии или недостатке этих животных (под тропиками) пользуются буйволами, свиньями, муфлонами. В Европе только в Испании за самое последнее время применяются кролики для получения невровак-цины. Для вакцинации отбираются лишь вполне здоровые, хорошо упитанные животные, преимущественно в возрасте 1V2-2 лет, с чистой, нежной кожей. Они приобретаются только из местностей, вполне благополучных по эпизоотиям крупного рогатого скота. Другой предупредительной мерой против попадания в Д. возбудителей различных зооноз (ящур, tbc) является тщатель- ная обсервация животных до прививки в течение не менее 5-8 дней. В местностях с эпизоотическим распространением tbc обсер-вируемые животные подвергаются при соответствующих условиях испытанию туберкулином. Перед прививкой животному делается общая ванна. Общепринятый метод добывания Д. основан на том факте, что эпителий наружных покровов у коров и телят является для возбудителя вакцины прекрасной питательной средой, в к-рой он при наличии известных условий сильно размножается. Процесс этот наиболее интенсивен в глубоких слоях эпителия и совершенно отсутствует в роговом слое. Для успеха прививки необходимо следовательно нарушение целости кожи, что достигается обычно путем поверхностных некровоточащих надрезов каким-либо режущим инструментом. Операция прививки выполняется следующим образом: животное крепко фиксируется на специальном столе, при чем поле прививки (паховая область, поверхность бедер, живота и груди) становится легко доступным для оператора (см. отд. таблицу, рис.1-3). Предназначенная для прививки область тщательно выбривается и подготовляется к операции с соблюде- jfBfs нием всех правил соврем, хирургии /Щ (мытье с зеленым мылом, протира- ||]||]| ние 70%-ным алкоголем и т. п.). llfJj||SI Прививку делают обычно путем ffljlfj проведения одиночных надрезов fflfji:/ длиной в 5-6 см, располагая их ЩЩ на расстоянии V-jt-2 см друг от few друга параллельно или перпенди- WL кулярно белой линии. Иногда все 'jr-поле операции покрывают густой Г сетью надрезов с помощью особого I инструмента со многими клинка- и ми. В СССР очень распространен || зубчатый скарификатор д-ра Уме- ^щ,В?\ но (Umeno, Токио), с помощью «ЙнУШ к-рого можно сделать одновременно Щтт^ 15 параллельных надрезов (см. рИс. 1. рисЛ).Шомье(Спаигшег) во Франции покрывает сплошными насечками бока животного до хребта, наружную поверхность бедер,часть груди и живота (см. отд. табл., рис.2). Гамалея в Ленинграде кроме указанных частей тела использует для прививки шею, вымя, промежность и внутрен. поверхность бедер («интенсивный метод»). На подготовленную т. о. поверхность кожи наносится помощью стеклянного шпаделя маточный посевной материал (или штамм-вакцина). От качества последней в значительной мере зависит успех прививки. Имеет значение не только специфическая вирулентность, но и состав банальной флоры штамм-вакцины, т. к. виды бактерий, содержащиеся в штамм-вакцине (маточная вакцина), обнаруживаются обычно и в веществе оспин, получаемых от прививки ею. Методика, имеющая целью получение сильно вирулентных штамм-вакцин, базируется обычно на двух основных наблюдениях. 1. Можно считать доказанным, что каждый случай генуинной коровьей оспы, а следовательно и оспенная вакцина (Д.) любого происхождения имеют своим первоисточником натуральную оспу челове- ка. 2. Вирулентность вакцины лучше всего сохраняется (или даже может быть усилена в случае ослабления) путем смены среды, на к-рой вакцина обычно культивируется (напр. прививкой с человека на теленка, с теленка на кролика и т. д.). Соответственно этому общеприняты два основных метода приготовления штамм-вакцины. 1. Обращаются к весьма вирулентному первоисточнику яда вакцины; жидкие или плотные составные части оспин от больных натуральной оспой людей прививают животным, обычно-теленку или кролику. Полученный материал, первоначально в виде папул или узелков- вариоло - вакцина' (variolo-vaccina), после 2-3 пассажей через организм животных приобретает все типичные свойства яда вакцины и служит штамм-лимфой. 2. Имеющуюся в распоряжении вакцину того или иного происхождения проводят время от времени через организм кролика (Lapina), т. к. усиление вирулентных свойств вакцины надежнее всего достигается этим путем (напр. пассажи через организм поросенка или морской свинки часто дают неопределенный результат). Широко практиковавшееся прежде применение ретрова-к ц и н ы (вакцина человека, привитая теленку) ныне оставлено по тем же основаниям, как и применение гуманизирован, вакцины в практике оспопрививания (см. выше). Очищение штамм-вакцины от нежелательных представителей банальной флоры (гемолизи-рующие кокковые формы и т. п.) достигается целесообразным консервированием ее в глицерине с применением в случае нужды нек-рых дезинфицирующих веществ (лучшие-эукупинотоксин и гвоздичн. масло).- После прививки животное остается на столе в течение 5-10 мин., затем отводится в стойло. Особого внимания требует уход за привитым животным (частая смена подстилки, уборка навоза и т. п.). Ежедневно два раза (утром и вечером) у животного измеряется t°, к-рая при нормальном развитии оспин не должна превышать 41°. После двухдневной инкубации развиваются оспины, последовательно проходящие стадии узелка и многокамерного пузырька. Содержимое оспин наиболее вирулентно спустя 96-120 час. после прививки и в то же время наиболее изобилует вакцинными тельцами Пашепа (Paschen; см. Вакцинные "тельца). Зрелая оспина теленка представляется в виде валика красивого серебристо-розового цвета с приподнятыми ровными краями и с центральным вдавлением. Ширина валика около б мм, длина соответствует протяжению надреза. Оспина очень напоминает своим видом кофейный боб (см. отд. табл., рис. 3). Съемка оспин делается в момент достижения ими наибольшей вирулентности- через 96-120 час. после прививки. О степени созревания оспин судят по их внешнему виду (величина, цвет, форма краев, корко-образование и т. д.) и по содержанию в них телец Пашена (Морозов). Обычно съемка делается через 96 час. после прививки и лишь при замедленном созревании (что иногда наблюдается зимой)-на несколько часов позже. Подготовка животного к этой операции и самая съемка оспин производится с соблю- дением обычных правил хир. асептики и антисептики. Белье, посуда, инструменты, перевязочный материал и т. п., необходимые для операции, стерилизуются непосредственно перед употреблением. Животное кладут на стол, и вся поверхность, покрытая оспинами, основательно обмывается теплой водой с зеленым мылом, обильно орошается стерильным физиол. раствором и обсушивается стерильными полотенцами. Все поле операции укрывается по краям прбстынями (см. отд. табл., рис. 4). Затем все развившиеся оспины соскабливаются до основания помощью острой ложки Фолькмана. Колич. соскоба колеблется в зависимости от способа прививки, степени зрелости и пышности развития оспин, от величины поля операции и т. п. Обычно получается до 0,7-1,0 соскоба на 1 кг живого веса теленка. Собранный в стерильную посуду соскоб оспин взвешивают и заливают небольшим количеством 80%-ного глицерина (80 ч. глицерина и 20 ч. воды).-Для консервирования Д. пригодны лишь лучшие сорта химически чистого глицерина простой или (предпочтительно) двойной дестиляции. В 80%-ном глицерине банальная флора Д. не в состоянии размноягаться и быстро гибнет (за исключением спороносных видов), тогда как оспенный вирус при известных условиях долгое время сохраняет жизнеспособность и вирулентные свойства-происходит т. н. «самоочищение» Д. Попытки ускорить этот процесс путем добавления к Д. различных дезинфицирующих веществ (эукупинотоксин, фенол, гвоздичное масло, риваноль, хино-золь и т. д.) не имели успеха, т. к. все эти вещества в той или иной степени бактерицидны и в отношении к оспенному вирусу. Удовлетворительные результаты дает выдерживание только-что снятого Д. в течение нескольких дней при комнатной t° (20-22°). Помещенный после этого в комнатный ледник для обычного хранения, Д. становится практически стерильным уже в течение 2- 3 недель без заметной потери вирулентных свойств. Перед окончательной обработкой Д. разбавляется 4- 5-кратным колич е' i-вом 80%-ного глицерина и тщательно и мельчается помошью специальных мелыын разнообразной kohl i- ~-~~; рукции (см. рисунок 2)- Рис Халибеуса, Пауля (Chalybaeus, Paul) и др. Растирание в мельнице Халибеуса производится вращением стержня(а)вгильзе(е). Стержень имеет винтовую нарезку-грубую вверху и почти микрометрическую внизу. Оспенный соскоб закладывается в воронку (с) и в растертом виде выталкиваетя из нижнего конца прибора. Весь аппарат устроен из неокисляющегося металла (фосфорная бронза). Чем тоньше измельчен десмон. тем равномернее в нем распределение вируса вакцины, тем меньше наклонность к
2. Мельница либеуса.
Ха
3
4
Рисунок 1. Комната для прививки телят. (Венский Оспенный ин-т.) Рисунок 2. Теленок, привитый по методу Шомье (4-й день после прививки). Рисунок 3. Зрелые оспины теленка, через 130 часов после прививки. (Из Oroth'a.) Рисунок 4. Теленок на столе перед съемкой оспин. (Оспенный ин-т в Мюнхене.) К ст. Детрит оспенный. 7Й9 расслоению на плотные частицы (осадок) и жидкий глицерин-явление, наблюдаемое иногда при продолжительном хранении плохо растертого детрита и могущее быть причиной неудач при прививке. Растертый соскоб для удаления волосков, грубых частиц, обрывков тканей и т. п. фильтруется через 1-2 слоя марли.--Хорошо приготовленный Д. представляет собой густую, гомогенную, серовато-белого или розового цвета жидкость, со слабым животным запахом (запах сырой кожи). Перед выпуском в обращение Д. разливают в различного рода мелкие приемники, обычно в стеклянные баночки и в капиляры. Наполненные капиляры запаиваются с обоих концов, баночки же (обычно емкостью 0,1, 0,15, 0,25 и 0,40 см3) закупориваются корковой пробкой и заливаются мастикой. Одного см3 Д. обычно достаточно для производства 100 привитии детям. С течением времени прививаемость Д. под влиянием глицерина, высокой внешней t° и других причин (частью еще недостаточно выясненных) постепенно падает. Кроме того свежеприготовленный Д. всегда содержит примесь посторонних зародышей, среди к-рых иногда встречаются виды, внушающие подозрение в смысле пато-генности для человека. Поэтому Д. до и после выпуска подвергают повторному контр элю на вирулентность и на качество и количество банальной флоры. В наст, время известно не менее 30 видов банальной флоры Д., в том числе 1) Micro-coccus до 8 видов; 2) Streptococcus 5 видов; 3) ложнодифтерийные палочки (кожные диф-тероиды) - несколько видов; 4) Bact. coli и paracoli, затем разного рода спороносные палочки (сенная), плесени, сарцины, дрожжи, актиномицеты и нек-рые другие. В числе их как наиболее подозрительные в отношении патогенности заслуживают отдельного упоминания гемолизирующие виды Staph. aureus и Staph. albus, затем Bact. coli. Напротив, часто встречающийся в Д. Streptococcus (4-5 разновидностей) повидимому совершенно непатогенен для человека и животных. Вопрос о присутствии в Д. заведомо патогенных бактерий (возбудитель ящура, столбняка, tbc) почти не имеет никакого практ. значения. По общему'мнению В. teta-ni встречается в Д. как величайшая редкость, возбудитель же tbc никогда не был найден в Д. За последнее время интерес к этому вопросу значительно обострился в связи с участившимися повсеместно жалобами на чрезмерно сильную реакцию после оспенных прививок и с нарастанием случаев вакцинного энцефалита (см.). Однако, вопреки старому мнению Ландмана (Landmann; 1896), большинство исследователей отрицает этиологическую роль банальной флоры в возникновении чрезмерно резких местных явлений после прививки и целиком объясняет эти аномалии действием самого оспенного вируса, т. к. подобные же местные явления наблюдаются и после прививки стерильным Д. С другой стороны существуют указания, чтолри прививке людям на кожные скарификации чистых культур микрококков и стрептококков, выделенных из Д., реакция отсутствует или наблюдается лишь в самой слабой степени (Dreyer, Meder). Т. о. основной задачей бактериологического контроля является исследование Д. на присутствие патогенных и подозрительных в этом смысле зародышей. Если контролем установлена полная гибель таких зародышей под влиянием глицерина, Д. признается годным к употреблению, даже если в нем и уцелело еще некоторое количество сапрофитов. Контроль ведется по общим правилам бактериологии. Обычно все привитые животные тотчас после съемки Д. убиваются, внутренние органы их подвергаются тщательному осмотру и (в случае необходимости) бактериологическому и микроскопическому исследованию. Контроль Д. на вирулентность производится обычно путем прививки мелким грызунам: на роговицу морской свинки-по Гинсу (Gins), на поверхность кожи кролику - по Кальметт - Герену (Calmette-Guerin) или внутрикожно-по Гроту (Groth). Д. считается еще пригодным для оспопрививания, 1) если в разведении 1:1.000 вызывает специфический кератит на скарифицированной роговице морской свинки (Гинс), 2) если в том же разведении, впрыснутый в кожу кролика, вызывает через 3-4 дня образование специфического воспалительного очага (Грот). Выпускаемые оспенными ин-тами Д. обладают обычно более высокой (резервной) вирулентностью (напр. дают положительную реакцию на роговице морской свинки или кролика еще в разведении 1:100.000 и даже 1:200.000). Нежелательные явления у привитых, наблюдаемые иногда при применении таких высоко вирулентных Д., побудили за последнее время поднять вопрос о стандарте для верхней границы вирулентности Д. Вопрос этот пока не получил удовлетворительного разрешения. Два обстоятельства несколько подрывают значение экспериментального метода: 1) в восприимчивости животных к вакцине наблюдаются резкие индивидуальные колебания, 2) результат эксперимента часто лишь приблизительно совпадает с результатом прививки на людях. Поэтому, когда требуется вполне точная проверка вирулентности Д., нельзя обойтись без прививки на людях. К ней приступают лишь после того, как бактериологическим исследованием установлено отсутствие в Д. патогенных для человека зародышей. Наиболее наглядны результаты у первично-привитых. Обычно применяется метод Шомье. На одной ручке ребенка прививают испытуемый Д. и одновременно на другой ручке делают прививку заведомо вирулентной вакциной. Через трое суток сравнивают развитие оспин на той и другой руке. Испытуемый Д. признается безукоризненным, если вызванные им оспины по своему внешнему виду и течению не отличаются от стандартных: непрерывисты, с ровными краями, занимают всю длину надреза. В методе Шомье оценивается следовательно лишь характер оспины, свойства же areolae не принимаются во внимание, и это является существенным недостатком метода. Т. о. самый старый способ-оценка Д. по результатам массового применения его на первично-прививаемых детях-остается и самым надежным. Определяется процент успешно приви- тых детей, процент развившихся оспин к общему числу надрезов, принимается во внимание течение, внешний вид, ширина оспин, размер красноты и инфильтрата. Необходима, разумеется, безупречная техника прививок. Имеются указания на возможность определения вирулентности путем подсчета телец Пашена в мазках из испытуемого Д. (Морозов, Пашен). Впрочем по наблюдениям Кии (Kii) активность Д. зависит не только от числа, но также (и притом в большей мере) от патогенной силы содержащихся в нем специфических зародышей; поэтому вирулентность Д. должна определяться произведением из количества вируса на некоторый коефициент, характеризующий силу его патогенных свойств. Сухой Д. Приготовление и транспортировка Д. связаны с особыми трудностями в условиях жаркого климата. Требуются особые методические приемы для поддержания стойкости и вирулентности пассажной вакцины, при чем самые лучшие серии Д. иногда быстро ослабевают и теряют прививаемость под влиянием высокой t° окружающей среды. Однако и в условиях умеренного климата очень велика потребность в препаратах Д., особо устойчивых к неблагоприятным термическим влияниям (у нас на юге и юго-вост. окраинах). Лучше всего этой потребности удовлетворяет сухой Д. Еще старым оспопрививателям было известно, что наиболее надежным способом сохранения гуманизированной вакцины является высушивание ее на стеклянных пластинках, палочках из слоновой кости и т. п. В наст, время при приготовлении сухого Д. чаще всего прибегают к высушиванию сырого соскоба оспин в вакуум-эксикаторе под хлористым кальцием при комнатной t°. Полученная через 24- 36 часов сухая масса тщательно растирается в ступке или в особой мельнице и просеивается через мелкую сетку. Добытый т.о. серовато-белый тонкий порошок заключают по 0,025-0,05 в небольшие стеклянные трубочки, выкачивают из них воздух и запаивают. Перед употреблением тонкий конец трубочки отламывается, порошок высыпается в маленькую чашку (напр. красильную солонку, часовое стеклышко и т. п.) и к нему добавляется 12-кратное количество 80%-ного стерильного глицерина (после высушивания сырой соскоб теряет около 3/4 первоначального веса). Порошок тщательно смешивается с глицерином, и смесь употребляется для прививок как обыкновенный глицериновый Д. (она должна быть использована в день приготовления, т. к. быстро теряет прививаемость). Данные о применении сухого Д. противоречивы, но в общем говорят в его пользу. В лабораторных опытах сухой Д. выдерживает t° термостата от 35 до 92 дней (Carini, Томаркин и Серебренникова). В практике оспопрививания сухой Д. испытан во многих странах жаркого пояса с хорошим в общем результатом даже при самых неблагоприятных условиях. За последнее время Оттеном (Otten) приготовлен сухой детрит, выдерживающий t° 41° в течение 60 дней. По Оттену, необходимым условием термоустойчивости является непрерывное пребывание сухого Д. in vacuo. Малейшая трещи- на в трубочке, заключающей в себе сухой Д., ведет к быстрой порче препарата. Вопросы о банальной флоре и о методике получения сухого Д. в состоянии практической стерильности мало разработаны. Указание некоторых авторов, что высушивание, теплота и время способствуют самоочищению сухого Д., нуждается в существенной поправке: процесс самоочищения сухого Д. под влиянием вышеперечисленных факторов совершается весьма медленно и всегда идет рука об-руку с потерей Д. вирулентных свойств. Необходимо следовательно, чтобы для приготовления сухого Д. избирались лишь те серии сырого соскоба, в к-рых предварительным контролем доказано отсутствие микроорганизмов, подозрительных в смысле пато-генности (гемолизирующие кокки и т. п.). Пересылка и хранение Д. Как указано выше, с течением времени под действием глицерина Д. постепенно слабеет и наконец совершенно теряет способность прививаться. Порча происходит тем скорее, чем выше t° окружающей среды. Так, при t° комнатного ледника или хорошего погреба Д. сохраняется без существенного ослабевания в течение 3-6 месяцев, комнатную t° он переносит уже значительно хуже, а при t° человеческого тела (37°) становится негодным для оспопрививания уже в течение 3-4 дней. В оспенных ин-тах Д. хранят обычно в комнатных ледниках при t° около 2-5°. В тех же температурных условиях надлежит по возможности держать Д. во время перевозки и хранения на местах. При пересылке на дальние расстояния Д. полезно упаковывать в деревянные ящики, выложенные изнутри толстым слоем какого-либо термоизолятора (пробка, вата, шерсть и т. п.). На прививочных пунктах, во врачебных участках и т. п. запасы Д. следует хранить на леднике или же, за отсутствием такового, в хорошем прохладном погребе.
Лит.: Гамалея Н., Оспопрививание, 2-е изд., Л., 1924; Морозов М., Отчет о командировке в заграничные оспенные ин-ты, Воронеж, 1911; Отчет Центр, гос. оспенного института НКЗдр. РСФСР за 1926 г., М., 1927; Сборник декретов, распоряжений и инструкций об обязательном оспопрививании, М., 1925; Handbuch der Pockenbekampfung und Impfung, hrsg. v. O. Lentz u. H. Gins, В., 1927 (лит.); Paul, Technik und Methodik der Vaccination (Hndb. der Techn. und Meth. der Immunitatsi'orschung, hrsg. von R. Krausu. С Le.vaditi, Band I, Jena, 1908); W a s i e-lewski Th. u. W i n k 1 e r W., Das Pockenvi-rus, Ergebnisse der Hygiene, Band VII, 1925 (лит.). Периодика.-Reyue internationale de la vaccine, Tours, 1910-14.
M. Морозов.